国产一级毛片国语普通话对白-国产一级毛片免-国产一级毛片视频-国产一级毛片视频在线!-免费国产成人高清无线看软件-免费国产成人高清在线观看不卡

網站首頁技術中心 > NK92 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞傳代/復蘇技巧
產品目錄
NK92 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞傳代/復蘇技巧
更新時間:2024-04-19 點擊量:214

NK92 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞

Human Malignant Non-Hodgkin's Lymphoma Patients With Natural Killer Cells ,NK-92

貨號:YJ-h0388(STR鑒定)

價格: 3000.0

規格: 1*106 

細胞介紹

NK-92是從一位患有急進性非霍奇金淋巴瘤的50歲白人男性外周血單核細胞衍生來的一株白細胞介素-2依賴型NK細胞株。這株細胞對很多惡性細胞有細胞毒性;鉻釋放試驗顯示它能殺死K562Daudi細胞。NK-92細胞(經過照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的體外免疫清掃而不危及血細胞的功能。NK-92細胞有以下特征: CD2, CD7, CD11a, CD28, CD45, CD54表面標記陽性,CD56亮;CD1, CD3, CD4, CD5, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20, CD23, CD34HLA-DR表面標記陰性。

細胞特性

1 來源:惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞

2 形態:淋巴母細胞,懸浮生長

3 含量:>1x10^6 細胞數

4 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1) 收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中(加入按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基)。

4備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶12傳代 。                      

一.培養基及培養凍存條件準備:

1 MEMα(推薦貨號:YJ-0003)+0.2mM Inositol(肌醇) +0.1mM β-mercaptoethanol β巰基乙醇)β+0.02mM Folic Acid(葉酸)+100-200U/mL recombinant IL-2白介素+12.5% HS(HYCLONE馬血清)+12.5% FBS+1% P/S

2 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%

3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

二. 細胞處理:

1 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

懸浮狀態下生長的細胞,可以通過向培養瓶中添加完全培養基來維持細胞的生長狀態,一般情況下細胞密度維持在1×105~1×10^6/mL(不同細胞對密度要求不同,)可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm,離心5min,棄去上清,補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

NK92 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞.png


下面T25瓶為例;

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×107個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10^6~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

注意事項

1.收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。

3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。

4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

2011年開始我們致力于在生命科學領域生物醫學實驗技術及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十余年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯系。

實驗技術服務:


滬公網安備 31011802001677號

主站蜘蛛池模板: 男人天堂2019| 欧美中文字幕在线视频| 国产精品伦理一区二区三区| 91成人免费| 五月亭亭六月丁香| 日本黄页免费| 六月丁香在线播放| 狠狠色噜噜狠狠狠狠888奇米| 波多野结衣在线网址| 中国毛片在线观看| 午夜精品久久久久久久99| 日本中文字幕一区| 女同网站在线观看免费| 精品欧美成人高清在线观看2021| 国产99er66在线视频| 97免费观看视频| 一级一级一级毛片| 五月深爱婷婷| 日韩有码视频在线| 欧美日韩一| 狼狼色丁香久久女婷婷综合| 黄在线| 国产精品一区二区在线播放 | 91麻精品国产91久久久久| 亚洲午夜网| 天天插视频| 九一精品| 国产精品一区二区三区高清在线| www.蜜臀| 91制片厂制作果冻传媒八夷| 一级毛片aa| 午夜窝窝| 天天干天| 深夜国产成人福利在线观看女同| 日本a在线播放| 欧美极品在线播放| 久久综合丁香| 久草最新网址| 黄色网址亚洲| 韩国三日本三级中文字幕| 国产久|