国产一级毛片国语普通话对白-国产一级毛片免-国产一级毛片视频-国产一级毛片视频在线!-免费国产成人高清无线看软件-免费国产成人高清在线观看不卡

網站首頁技術中心 > siRNA轉染試劑說明書
產品目錄
siRNA轉染試劑說明書
更新時間:2015-05-08 點擊量:2061

  siRNA轉染試劑說明書

                                                 

貨號:YJ0871

保存:2-8℃

 

組分說明

 

   Catalog no.                YJ0871           YJ0871A

   Kit Size                  0.5 ml             1 ml

 

siRNA Transfection Reagent         0.5 ml           1 ml

 

產品簡介

 

         siRNAFect 是一種的陽離子脂質體轉染試劑。適用于多種細胞的 siRNA  轉染,其原理為帶正電的脂質體通過靜電作用結合到 RNA  的磷酸骨架上形成轉染復合物,將轉染復合物加到細胞上可以與帶負電的細胞膜表面結合即可通過胞吞作用將 siRNA 導入細胞中。主要應用于 RNAi  研究,基因表達和基因功能研究等。

 

注意事項

 

 1.  轉染試劑使用前請先震蕩搖勻。

 

 2.  轉染效率與細胞密度有很大關系,不同實驗間應應保持一個基本的傳代步驟,且應確保轉染時細胞沒有長滿或處于靜止期。一般貼壁細胞轉染的*細胞密度是70-90%,懸浮細胞的*細胞密度為2-4x106 細胞/ml,用于轉染的*細胞密度根據不同的細胞類型或用途而異。  

 

 

使用方法

 

    以下操作步驟以12孔板為例,其他孔板按照表1中所列用量進行實驗。

 

  1.  在12孔板的每孔中加入1  ml正常生長培養基(根據需要可加入適量的血清),接種1-3x10  細胞。在37℃條件下培養細胞濃度至70-90%。根據細胞類型的不同,這一過程通常需要18-24小時不等。由于轉染效率培養條件及其敏感,所以應在不同的實驗間建立一個標準的傳代流程。

 

  2.  將20 pmol iRNA溶于終體積為50 μl的無血清,無抗生素的培養基中,渦旋5秒或者用槍盡量吹打均勻。

 

  3.  將2.6  μl轉染試劑稀釋到終體積為50 μl的無血清,無抗生素的培養基中,渦旋10秒。

 

      注意:溶解過程中可能會出現白色混濁,但不影響轉染效率。

 

  4. 將稀釋好的轉染試劑加入到核酸溶液中(注意順序一定不能顛倒),渦旋1秒,室溫孵育15分鐘,使轉染試劑與核酸形成穩定的復合物(此步驟盡量不要超過20分鐘,否則會影響轉染效率)。

 

  5.  向穩定復合物中加入900  μl帶血清的培養基,用槍輕輕吹打均勻。

 

  6.  吸去培養板中原有的培養基,加入步驟5中混合好的培養基。在37℃條件下培養細胞24-72小時。

 

  7.  根據細胞類型和啟動子活性不同,在轉染后24-72小時分析細胞抽提物,檢測報告基因活性。

 

  8.  對于穩定表達的細胞系,在轉染72小時后,按1:10的比例在細胞中加入選擇培養基對已轉染的報告基因進行篩選。

 

                                表1:  對不同大小的細胞培養皿,試劑的用量

 

培養板   每孔表面積  鋪板培養基體積  siRNA和稀釋終體積(μl)siRNA轉染試劑體積

                             

 

96孔         0.3        100  μl        3 pmol至10  μl     0.4  μl至10 μl

 

24孔          2         500  μl        10 pmol至20  μl       1.3  μl至20 μl

 

 12孔          4        1 ml           20 pmol至50  μl      2.6  μl至50 μl

 

35 mm        10         2 ml          50 pmol至100  μl       6.6  μl至100 μl

 

 6孔         10         2 ml          50 pmol至100  μl     6.6  μl至100 μl

 

  60 mm       20        5 ml     100 pmol至200  μl       13.3 μl至200 μl

 

 10 cm        60        15 ml      300 pmol至500  μl       40 μl至500 μl

滬公網安備 31011802001677號

主站蜘蛛池模板: 91网站视频在线观看 | 国产成人资源 | jizz美国| 精品国产96亚洲一区二区三区 | 久热网站| 狠狠干欧美 | 97人人澡 | 99视频在线免费 | 日韩伦理片在线 | 99久久国产免费中文无字幕 | 欧美激情综合 | 久久精品女人毛片国产 | 欧美性受 | 久久久久国产精品 | 久久久久久88色偷偷 | 夜夜天天操 | 九九视频在线看精品 | 亚洲欧美v国产一区二区 | 天天综合天天综合色在线 | 久久99精品视频 | 91精品国产综合久久精品 | 欧美在线亚洲 | 一级视频在线观看 | 狠狠色丁香婷婷综合久久来 | 日产中文字乱码卡一卡二视频 | 美日韩精品 | 欧美xxxx做受欧美88bbw | 黄色网页观看 | 三级网站在线 | xxxxx性bbbbb欧美 | 久久国产成人精品 | caoporn视频 | 91视频色| 黄色网 在线播放 | 欧美多人三级级视频播放 | 黄色在线资源 | 日本韩国香港三级 | 国产一级第一级毛片 | 欧美一级v片 | ririai66在线观看视频 | 欧美一级中文字幕 |